细菌寄生虫代表了一个庞大的生化多样性的宝库,可以重新应用于生物科技领域。这种蛋白质包括两组预测的细菌除此以外寄生虫的脱氨酶超家族,其中都的成员已经被开发新在基因撰稿技术中都得以应用。
因为那时候描述的甲基化脱氨酶作用在单链核苷酸,它们在核苷酸撰稿中都的使用只能双链DNA(dsDNA)的解链--例如通过CRISPR-Cas9系统。
到现阶段,肝细胞DNA(mtDNA)内的核苷酸撰稿被肝细胞中都的引导RNA的传导等难题所阻滞。因此,到现阶段,mtDNA的操控一直被限制在肝细胞基因组的定向受到破坏。
最近,刘如谦一个团队描述了一种细菌除此以外寄生虫,名为为DddA,可以催化dsDNA内的甲基化的脱氨。分析技术人员内部设计了瓦解的DddA半体,其分开是无毒和无活性的,直到与电子设备DNA相结合蛋白相结合后两者被拉近。
瓦解-DddA半体、转录激活剂样效应器感测器蛋白和尿嘧啶糖苷酶抑制剂的融合导致了无RNA的DddA衍生的甲基化核苷酸撰稿器(DdCBEs),它能以高目标特异性和系列产品催化人mtDNA中都C-G到T-A的再生。
分析技术人员使用DdCBEs来模拟生物细胞中都疾病相关的mtDNA变异,导致呼吸速率和氧磷酸化的变化。无CRISPR的DdCBEs可以对mtDNA进行时精准的操控,而不是通过核酸核苷酸酶对mtDNA进行时切割导致的mtDNA拷贝的去除,对肝细胞疾病的分析和治疗具有潜在广泛的意义。
值得注意中有:
Paul A. Muller et al. Microbiota modulate sympathetic neurons via a gut–brain circuit. Nature (2020).
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